做电泳跑page、提取质粒、做WESTERN BLOT时留意点
做电泳跑page、提取质粒、做WESTERN BLOT时留意点 | 工夫: May-7 13:46:55 | 分类:技能栏目
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1. 跑page胶的时分
小电压跑会制止高电压发生的热量尔招致的胶层变形。低电压泳道会比大电压泳道跑的直一些，且分散结果更高，有利于分子量相差不大的卵白分散。
2. 提取质粒的时分
较后一步的酒精挥发很要害，根本上是厥后续的酶切反响的决议性要素。以是这一步只管即便挥发长一点工夫，较好是空调吹热风，或是37度温箱放长一点的工夫，我试过室温留宿，酶切很好。
3. 做WESTERN BLOT 的时分
各人每每会探索一抗、二抗的浓度，关闭工夫，曝光工夫等等，而每次变更此中的一个条件就必要重新跑胶、转膜，乃至重新提卵白，如许会糜费少量的工夫。实在完全没有须要如许。一次转膜后，将PVDF膜晾干，扩充成小块，保管起来，用的时分取出一块，没有任何影响。这关于探索条件的战友来说，浪费了少量的工夫。
